製品概要｜スペシャルサイト｜ロシュ・アプライド・サイエンス

コンベンショナルPCR装置での1ステップ RT-PCR

リアルタイムPCR装置での1ステップ RT-PCR

コンベンショナルPCR装置での2ステップ RT-PCR

リアルタイムPCR装置での2ステップ RT-PCR

その他の逆転写酵素

RT-PCRを行うにあたり、最も重要な要素は適切な逆転写酵素の選択です。上のワンステップとツーステップRT-PCRの推奨製品以外にも、ロシュ・ダイアグノスティックスは以下の表の様々な製品を提供しています。各製品には、それぞれ違った特性があります。各製品の特長を参考に、実験目的に適した酵素をご選択ください。

1ステップ RT-PCR - スピーディなセットアップとコンタミネーションリスクの低減、高感度検出を実現できます。

	Tth DNA Polymerase	Titan One Tube RT-PCR System	Titan One Tube RT-PCR Kit
製品構成	逆転写活性を併せ持つ耐熱性DNAポリメラーゼ	AMV逆転写酵素とExpand High Fidelity酵素のブレンド
逆転写産物サイズ	1 kb以内	6 kb以内
プライマー	特異的プライマー	特異的プライマー
反応温度	+55～+70℃	+45～+60℃
RNase H 活性	-	++
陽イオン要求性	Mn²⁺	Mg²⁺
感度 - トータル RNA	+	1 pg～1 µg
感度 - mRNA	+	++
感度 - ウイルス RNA	+	+
感度 - RNA（高次構造）	+	+
特異性	+	+
正確性	-	+
完全長 cDNA	-	++
修飾ヌクレオチドの取り込み	可能	可能
UNGを用いたキャリーオーバーコンタミネーション防止方法の使用	可能	不可
バッファー	PCR用とRT-PCR用の2種類のバッファーが含まれます。	1種類の反応バッファーで両反応を行います。
特長	高い耐熱性を持ちます。 RNase H活性なし dUTPの取り込みが可能	6kbまでのRT-PCR産物が合成できます。 mRNAを高感度に検出できます。
製品番号	1 480 022 (500 units)	1 888 382 (25 reactions) 1 855 476 (100 reactions)	1 939 823 (50 reactions)

2ステップ RT-PCR - プライマーや酵素、反応温度など、実験目的に応じて、幅広い選択肢の中から理想的な逆転写校をを選べます。

	Reverse Transcriptase M-MuLV	Expand Reverse Transcriptase	Reverse Transcriptase AMV	First Strand cDNA Synthesis Kit	cDNA Synthesis System
逆転写産物サイズ	10 kb	14 kb	12 kb
プライマー	特異的プライマー、オリゴ(dT) ランダムヘキサマー	特異的プライマー、オリゴ(dT) ランダムヘキサマー	特異的プライマー、オリゴ(dT) ランダムヘキサマー
反応温度	+37℃	+42℃ (最高+50℃)	+42℃ (最高+60℃)
RNase H 活性	+	-	++
感度 - トータル RNA	+	++	++
感度 - mRNA	+	++	++
感度 - ウイルス RNA	+	+	+
感度 - RNA （高次構造）	+(+)	+	+
特異性	未確認	+	+
正確性	+	+	+
完全長 cDNA	+	+++	++
標識ヌクレオチドの取り込み	可能	可能	可能
UNGを用いたキャリーオーバーコンタミネーション防止方法の使用	未確認	未確認	未確認
バッファー	1種類の反応バッファーが含まれています。DMSOやDTT、Betainを別途加えることも可能です。	1種類の反応バッファーが含まれています。DMSOやDTT、Betainを別途加えることも可能です。	必要なすべての試薬が含まれています。
特長	エンドヌクレアーゼ活性なし AMVよりRNase H 活性が弱い	14 kbまでの完全長cDNA合成が可能 RNase H 活性がない	12kbまでのcDNA合成が可能 M-MuLVより耐熱性が強い。
製品番号	1 062 603(500 units)	1 785 826 (1,000 units) 1 785 834 (5,000 units)	1 495 062 (500 units) 109 118 (1,000 units)	1 483 188 (30 reactions)	1 117 831 ( 10 reactions)