アレイ合成技術

マスクレスアレイ合成技術では微小な鏡の傾きをコンピューター制御し、紫外光を光感受性保護基に当てます。この操作はコンピューターで制御している為、非常に簡単に任意のアレイを合成することができます。

例えばGC・・・の配列のプローブを合成するには、、、

A : G（グアニン）を合成したいDNAプローブ領域に紫外光を照射し、光感受性保護基をはずします。
B : 次にGを添加し、光感受性保護基をはずしたDNAプローブ末端にGを合成します。
C : 残余のGを洗い流した後、C（シトシン）を合成したいDNAプローブに紫外光を照射し、光感受性保護基をはずします。
D : 次にCを添加し、光感受性保護基をはずしたDNAプローブ末端にCを合成します。
E : 同様な処理を繰り返すことで、DNAプローブを合成します。 

コンピューターで制御される微小な鏡

鏡の大きさは十数ミクロン四方です。参考にスポットタイプのアレイ作製に用いられるマイクロスポッターピンを置いてみました。この大きさの違いを感じていただければと思います。

フレキシブルなアレイデザインを利用して作成したアレイでハイブリダイゼーションを行った例

図3の左上図はDNAプローブの大きさや間隔を変えてアレイを作成して、実際のサンプルをハイブリダイゼーションさせて得られた画像です。DNAプローブの大きさや間隔を自由に変更できることがわかります。右下図はコントロールDNAプローブ、1塩基ミスマッチ、2塩基ミスマッチ、3塩基ミスマッチの4種類のプローブをアレイ上に設計し、蛍光ラベルしたコントロールDNAをハイブリダイゼーションした画像です。蛍光強度の違いにより、写真のような濃淡のある画像が得られています。いずれもアレイの設計がフレキシブルであることを示しています。