カテゴリ名: 組織サンプル処理について
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- 新しいPCR Grade Proteinase K, recombinant (溶液タイプ＆凍結乾燥品タイプ) をin situ ハイブリダイゼーションに使用する事がかできますか？
(1802 回の閲覧) - 脱パラフィンに用いるキシレン(Xylene) やエタノールにもDEPC を加える必要がありますか？
(1289 回の閲覧) - in situ ハイブリダイゼーションの結果、非特異的なシグナルが大量に生じます。アセチル化(acetylation) のステップがバックグラウンドを低下させる効果があると聞いたことがあります。アセチル化の効果について教えてください。また、この操作を行う必要があるでしょうか？
(2627 回の閲覧) - 組織中に強く発現するmRNA の検出にISH を使用しました。特異シグナルは得られたものの、シグナルの強度は非常に低いものでした。このため、ISH のシグナル強度を高めるために、プロティナーゼK 処理を用いて組織中へのプローブの浸透を促進しようとしましたが、うまくいきませんでした。この操作では、かえってシグナルが完全に失われてしまいました（組織形態は十分に維持されているにもかかわらず）
(1171 回の閲覧) - ISH のプロトコールにプロティナーゼK 処理のステップを加えて、ISH で特異的なシグナルがうまく得られていますが、プロティナーゼＫ処理を行った場合に切片の質が明らかに劣化しました。また、非特異的なバックグラウンドが生じる場合もあります。
(1311 回の閲覧) - in situ ハイブリダイゼーションを行った後、組織がダメージを受けているように見えることがしばしばあります。ただし、実験前や親水化(rehydration) の後の段階では組織のダメージは見られません。また、シグナルは薄めの青色が拡散したような発色になり、個々の細胞を特定することは容易ではありません。何が理由として考えられるでしょうか。
(1301 回の閲覧) - プロティナーゼK 処理を行った後、幾つかの組織切片がスライドグラス上から失われました。さらに、スライドグラス上に残った切片は十分に形態が維持されていませんでした。文献によると、使用するプロティナーゼK の濃度は実験ごとに大幅に異なります。貴社でお勧めの濃度条件があれば教えてください。
(1681 回の閲覧) - ポリ-L-リジンをコートしたスライドグラスから切片が剥がれ落ちるトラブルに何度も直面しています。何が原因と考えられるでしょうか？また、この問題を解決する方法があれば教えてください。
(2840 回の閲覧) - 組織サンプル（直径１mm の植物サンプル）をパラフィン中に包埋する際に、固形ワックスのブロッ
ク中にある組織が視覚上透明であるため、その位置を見つけるのが大変に困難です。さらに、マイクロトーム上で目的とする組織面の切片を作製するために、ブロックの向きを定めることも非常に困難です。これらの問題を解決する方法があれば教えてください。
(1260 回の閲覧) - パラフィン包埋組織の切片を作製する段階で問題があります。例えば、切片が壊れたり、ばらばらになったり、割れたり、裂けたり、傷ついたり、削られたりします。また、切片が平たいリボン状にならずに巻き上がってしまうこともあります。このような切片作製上のトラブルを改善する方法があれば教えてください。
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