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新発売のUniversal ProbeLibrary Set, Human Reference Gene Assaysは、ヒト対象のリアルタイム定量PCR 実験において、最適なリファレンス遺伝子を選択するためのセットです*。
定量PCRにおいて適切なリファレンス遺伝子を選択することは、データの精度と再現性を得るために非常に重要です。 本セットには、10種類の遺伝子のプライマーとプローブが含まれます(各100回/50μl反応)。本セットで10種類を同時に評価することによって、最 も変動の少ないリファレンス遺伝子をスピーディに選択することが可能です。また、それぞれの遺伝子に対するアッセイは単独でも購入が可能です(各200回 /50μl反応)。
Universal ProbeLibrary Reference Gene Assaysは全て、リアルタイムPCRによるウェットチェック済のため、面倒な検討は必要ありません。また、12merの加水分解プローブは、LightCycler® Yellow 555(VIC™と 同等の波長)とダーククエンチャーでラベルされ、165種類のUPLプローブとは配列とラベル色素が異なるため、これらを組み合わせてデュアルカラー・マ ルチプレックス反応が可能です。 ProbeFinderソフトウェア上で、対象生物種において「Design multiplex PCR with reference gene」の項目にチェックを入れると、in silico PCRで確認されたマルチプレックス反応用アッセイのデザインが可能です 。
*重要 :キャピラリタイプLightCycler® システム(3チャンネルタイプ)では、LightCycler® Yellow 555ラベルされているUniversal ProbeLibrary Reference Gene Assayが検出できませんのでご注意ください。
プライマーと165種類のFAMラベル加水分解プローブ(UPLプローブ)を組み合わせ 、あらゆる転写産物に対する定量PCR実験をオンライン上で迅速にデザインできる画期的なシステムです。
アクセスフリーのProbeFinderソフトウェア(www.universalprobelibrary.com)では、シングル反応はもちろん、 マルチプレックス反応や複数配列を共通/区別して増幅できるアッセイのデザインが可能です。 データベースを参照する生物種(ヒト、マウス、ラット、線虫、ゼブラフィッシュ、ショウジョウバエ、チンパンジー、シロイヌナズナ、イネ、トウモロコシ、 酵母)では、自動的にin silico PCRによる配列特異性や相補性の確認が行われます。
★各250回/50μl反応、625回/20μl反応
お詫びと訂正:
バイオケミカ2007 NUMBER 2(No.107)における記事「Universal ProbeLibraryを使用した植物miRNAのリアルタイム定量PCR」の表1内のmiRNA配列(miR166およびmiR167)に誤りがござ いました。皆様にご迷惑おかけしましたことをここにお詫びし、正しい表を下記に掲載させていただきます。
表 1 : miRNA and primer sequences.
| miR156 | miRNA sequence | UGACAGAAGAGAGUGAGCAC |
| Forward primer | GCGGCGGTGACAGAAGAGAGT | |
| UPL RT primer | GTTGGCTCTGGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACCAGAGCCAACGTGCTC | |
| miR159 | miRNA sequence | UUUGGAUUGAAGGGAGCUCUA |
| Forward primer | CGGCGGTTTGGATTGAAGGGA | |
| UPL RT primer | GTTGGCTCTGGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACCAGAGCCAACTAGAGC | |
| miR166 | miRNA sequence | UCGGACCAGGCUUCAUUCCCC |
| Forward primer | TCGCTTCGGACCAGGCTTCA | |
| UPL RT primer | GTTGGCTCTGGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACCAGAGCCAACGGGGAA | |
| miR167 | miRNA sequence | UGAAGCUGCCAGCAUGAUCUA |
| Forward primer | TCGCGTGAAGCTGCCAGCAT | |
| UPL RT primer | GTTGGCTCTGGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACCAGAGCCAACTAGATC | |
| Universal | Reverse primer | GTGCAGGGTCCGAGGT |
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BIOCHEMICA2008 NUMBER2 (No111)
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