FastStart PCR Master：より簡単なホットスタートPCRが登場しました。

Gene Expression コーナー

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ファストスタートPCRマスターはホットスタートPCR製品の新たなラインナップです。このファストスタートPCRマスターはファストスタートTaq DNAポリメラーゼをより簡単に使うことが出来ます。

ファストスタートPCR マスターは、2倍濃度のready-to-useのマスターミックスで、PCRに必要な全ての試薬が含まれています。約1 kbまでのDNAやcDNAを増幅できます。プラスミドDNAのようなシンプルなテンプレートからは、より長い断片を増幅します。

ホットスタートPCRのプロトコールは、特異性、感度、収量を大幅に改善することが証明されています。ファストスタートTaq DNAポリメラーゼの熱感受性アミノ残基ブロッキングは、室温において酵素が不活性になるように修飾をしています。その為、室温においてプライマーが非特 異的にテンプレートに結合しても増幅反応を行いません。高温でのインキュベーションによりブロッキング残基がはずれ、ファストスタートTaq DNAポリメラーゼは活性化され増幅反応を開始します。

利点

• ピペッティングの回数が少なくなります。
• 便利なプレマスターミックスなので、時間を節約します。
• コンタミネーションのリスクとピペッティングミスを低減します。
• 全自動分注ロボットによるPCRセットアップに最適です。セットアップ時間を延長しても、マスターミックスは室温で安定です（図1）。
• ホットスタート酵素のファストスタートTaq DNAポリメラーゼと、高精製度のヌクレオチドにより、PCRの感度と特異性、収量が向上します（図2）。
• 1 kbまでのDNAやcDNAを増幅します。

PCRグレード, ヌクレオチドを含みます

ヌクレオチドはPCRに不可欠な試薬です。この新しいマスターミックスには、高感度PCRやRT-PCRの為に特別に合成されたPCRグレード, ヌクレオチドが入っています。このPCRグレード, ヌクレオチドはPCR阻害物質を一切含んでいません。

• PCRグレード, ヌクレオチドは、99%以上のデオキシヌクレオチド3リン酸（dNTP）と、0.9%未満のデオキシヌクレオチド2リン酸（dNDP）からなります。
• 合成過程において、PCRグレード, ヌクレオチドは修飾基のついたdNTPや四リン酸塩、ピロリン酸塩を除去しています。

ファストスタートPCRマスターとトランスクリプター1stストランドcDNA合成キットの組み合わせは、2ステップRT-PCRで最高の結果を示します。

PCRとRT-PCRの情報は当社のインターネットサイトを参照ください。

www.roche-applied-science.com/pcr

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関連製品名	製品番号	包装単位	希望価格
トランスクリプター1stストランドcDNA合成キット	4379012	1キット (50回反応分)	←製品番号をクリック

図1：ファストスタートPCRマスターによるコラーゲン遺伝子の1.1 kb断片の増幅。 テンプレートとしてヒトゲノムDNAを用い、反応ミックスを調製後、室温で様々なインキュベーション時間をおいた後、PCRを行いました。反応ミックスは、室温で少なくとも5時間安定でした。

図2：β-グロビン遺伝子の111 bp断片の増幅。 各メーカーから市販されているマスターミックスを用いて、様々な量のヒトゲノムDNAをテンプレートとして増幅しました。

BIOCHEMICA2005 NUMBER4 (No101)