-X-tremeGENE siRNAトランスフェクション試薬- siRNAによるジーンノックダウンの新しいトランスフェクション試薬

ジーンノックダウン コーナー

Order INFO

製品名	製品番号	包装単位	希望価格
X-tremeGENE siRNA トランスフェクション試薬	4476093	1ml (400回*)	¥23,000
	4476115	5×1ml (2000回*)	¥92,000

*24ウェルプレートでトランスフェクションを行った場合の回数です。

RNA干渉‐ファンクショナルゲノミクスにおける大きな前進

RNA干渉（RNAi）は動物や植物における配列特異的な、転写後のジーンサイレンシングのプロセスで、相補的なmRNAの分解の引き金となる二重鎖RNA(dsRNA)を導入します。in vivoやin vitroで 作成された、長いdsRNAは真核生物内で、DICERと呼ばれるRNase III様酵素により、21－23ヌクレオチド長の短い干渉RNA(siRNA)に切断されます。siRNAはRNA誘導サイレンシング複合体(RISC) に取り込まれ、siRNA鎖の一方がmRNAの相補的部位にアニーリングし、最終的にmRNAが分解されます。

siRNAやショートヘアピンRNA(shRNA)を使用することで、特異的遺伝子の発現が抑制されます（ジーンノックダウン）。人や他の哺乳類のいか なる遺伝子でも、dsRNAジーンサイレンシング技術を使用して、そのターゲットとなりえます。遺伝学における強力なツールとして、RNAiは哺乳細胞シ ステムにおける標準的な技術となりました。RNAテクノロジーは、薬剤探索や標的の検定、基礎研究において、遺伝子の機能の特定を大きく加速しました。

導入‐ジーンノックダウン実験における必須のステップ

短い干渉RNAはトランスフェクションにより、細胞内に直接導入することができます。脂質に基づくトランスフェクション試薬は、人や他の哺乳類細胞へのsiRNAの導入において、簡便で信頼性のある技術を提供します。

X-tremeGENE siRNAトランスフェクション試薬は、siRNA単独、およびsiRNAとプラスミドDNAとの複合体を形成するよう至適化されています。トランスフェ クトする複合体はジーンサイレンシングを誘導するために、哺乳細胞に効率的に導入されます。操作法には、複合体の形成(希釈されたトランスフェクション試 薬とsiRNAのミキシングとインキュベーション)と、細胞への複合体の添加が含まれます。培地の変更（無血清培地への）はトランスフェクションの前後と も必要ありません。

性能と柔軟性でのずば抜けた価値

ロシュ・ダイアグノスティックスの新規のX-tremeGENE siRNAトランスフェクション試薬により、多くの細胞株におけるジーンノックダウンの、細胞的、機能的結果に関する研究を効果的に行うことが出来ます。 高いノックダウン効率を示すデータが図1に提示されます。この試薬は最大の柔軟性を提供し、siRNAおよびコトランスフェクションに基づくRNAi実験 を、ひとつの試薬で行うことが出来ます（次の記事をご参照ください）。

高いトランスフェクション効率と低い細胞毒性、多種類の細胞で効果的という、現在のトランスフェクション試薬に求められる全ての特徴を、X-tremeGENE siRNA トランスフェクション試薬は備えています。

図1：ノックダウン効率の比較。4種類の細胞において、X-tremeGENE siRNAトランスフェクション試薬とその他のサプライヤーの試薬(A-E)が比較されました。細胞は、メーカーのマニュアルあるいは100 nMのsiRNAを使用した標準法に従って、ヒポキサンチン グアニン ホスフォリボシルトランスフェラーゼ(HＰRT)特異的siRNAがトランスフェクトされました。ノックダウン効率はライトサイクラーを用いたリアルタイ ムPCRで定量されました。

• 効果的なジーンノックダウン
  ジーンノックダウンによる細胞および機能の重要性を研究するための、高い効率でのトランスフェクション
• 最大の柔軟性
  siRNAとコトランスフェクションに基づくジーンノックダウンがこのひとつの試薬で可能
• 優れた価値
  効果的なジーンサイレンシングの間に、あなたの資源を拡張するために、X-tremeGENE siRNA トランスフェクション試薬を選んでください。

表1. いろいろな細胞でのトランスフェクション効率

＞90％ノックダウン	70-90％ノックダウン	60-70％ノックダウン
COS-7	CHO-K1	Hep G2
HEK-293	HITC116	HT29
HEK-293T	MCF-7
HeLa
Huh-7
NIH 3T3

より詳しい情報は、
www. roche-applied-science.com/transfection

BIOCHEMICA2004NUMBER3(No96)