ベクターベースのshRNA実験でのFuGENE 6トランスフェクション試薬の応用

Tips & Facts

siRNAsやshRNAsの導入によるRNA干渉は、ヒトや哺乳細胞における特異的遺伝子の発現の確実なダウンレギュレーションを可 能にします。細胞内に導入されたsiRNAは、直接にトランジェントな遺伝子のサイレンシングに使用できますので、shRNAの細胞内合成のためにエン コードされたベクターは、遺伝子機能の長期研究には最適なアプローチです。

デリバリーはsiRNAのアプリケーションにおいて最もクリティカルなステップです。最近のデータは、siRNA実験用ベクターのデリバリーでの、FuGENE 6トランスフェクション試薬の成功例を示しています（アプリケーションノートは近日発表）。

図：PML - 特異的shRNAによるNIH 3T3細胞中の前骨髄球性白血病タンパク質（PML）の除去（P. Paddison & G. Hannon, unpublished results)。

下記の論文はRNAiのアプリケーションにおけるFuGENE 6トランスフェクション試薬の使用について記述されています。

• Hemann MT, Fridman JS, Zilfou JT, Hernando E, Paddison PJ, Cordon - Cardo C, Hannon GJ & Lowe SW （2003） An epi - allelic series of p53 hypomorphs created by stable RNAi produces distinct tumor phenotypes in vivo. Nature genetics 33: 396 - 400.
• Paddison PJ, Caudy AA, and Hannon GJ （2002） Stable Suppression of Gene Expression by RNAi in Mammalian Cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99: 1443_1448.
• Paddison PJ, Caudy AA, Bernstein E, Hannon GJ, Conklin DS （2002） Short hairpin RNAs （shRNAs） induce sequence - specific silencing in mammalian cells. GENES & DEVELOPMENT 16:948 - 958.
• Paddison PJ, and Hannon GJ （2002） RNA interference: The New Somatic Cell Genetics. Cancer Cell 2: 17 - 23.

FuGENE 6トランスフェクション試薬の詳細は、http://www.roche-applied-science.com/sis/fugene/
を訪問してください。

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BIOCHEMICA2003NUMBER4(No93)