分子生物学：簡単な脱リン酸化と迅速なDNAライゲーション

Tips & Facts

より簡単な熱失活のために、シュリンプ アルカリホスファターゼを選んでください。高品質のシュリンプ アルカリホスファターゼを使用して、DNAベクターの5’末端の脱リン酸化を簡単にしてください。脱リン酸化後、65℃でわずか15分加熱するだけで、酵 素は完全に不可逆的に失活し、フェノール：クロロフォルム抽出を避けられます。

1チューブ反応の簡便さをエンジョイしてください：制限酵素消化、脱リン酸化、ホスファターゼ不活化、ライゲーションがすべて同じチューブ内で行えます。

ラピッドDNAライゲーションキットによる5分間でのDNAライゲーション

ライゲーションのためのオリジナルキットです。迅速で柔軟性があり、簡単な実行によるDNAライゲーションを経験してください。

• 効率的なライゲーションが、室温5分で行えます。
• 粘着及び平滑末端DNAフラグメントがライゲーションできます。
• コンストラクトの作成、コンピタント細胞へのトランスフォーム、バクテリアの播種がすべて1日で行えます。次の日には形質転換コロニーが拾えます。
• 酵素とレディー・ツー・ユースのバッファーが入った完全なキットのため、時間が節約できます。

典型的な結果

それぞれ、Sma IあるいはHind IIIで切断し、アルカリホスファターゼで脱リン酸化した50 ngのpUC19 DNAを、標準的な方法に従い、150 ngの平滑及び粘着末端インサートDNAとライゲートしました。インサートは電気泳動で精製し、アガロース消化でゲルから単離しました。

コンピテントなE. coli JM83細胞にトランスフォームした後の白色コロニーの収量
pUC19 未切断	pUC19のSma I切断 + 2,100 bpインサートDNA	pUC19のHind III切断 + 2,300 bpインサートDNA
2.0 x 107	6.0 x 105	1.3 x 106

ラピッドDNAライゲーションキット－アプリケーション

• プラスミドベクターへのクローニング
• リンカーのライゲーション
• ライゲートしたDNAのアガロースゲル電気泳動での分析
• ファージベクターへのクローニング
• 直鎖DNAの再環化

エレクトロポレーションは、High Pure PCRプロダクト精製キットとの組み合わせで行えます。

Order INFO

製品名	製品番号	包装単位	希望価格
アルカリホスファターゼ、 シュリンプ	1758250	1,000ユニット	←製品番号をクリック
ラピッドDNAライゲーションキット	1635379	1キット(40回)	←製品番号をクリック
High Pureプラスミド アイソレーションキット	1754777	50回精製	←製品番号をクリック
	1754785	250回精製	←製品番号をクリック
High Pure PCRプロダクト 精製キット	1732668	50回精製	←製品番号をクリック
	1732676	250回精製	←製品番号をクリック
アガロースゲルDNA 抽出キット	1696505	1キット (最大100回)	←製品番号をクリック
IPTG	1411446	5g	←製品番号をクリック
X - Gal	745740	1g	←製品番号をクリック
アンピシリン	835242	5g	←製品番号をクリック

BIOCHEMICA2003NUMBER4(No93)