新しいライトサイクラー試薬－至適な結果への最大の簡便性

ライトサイクラー コーナー

ロシュ・ダイアグノスティックスは、ライトサイクラー機器で使用する、新しい2種類のDNA増幅キットを新発売いたしました：

• ライトサイクラー ファストスタートDNAマスター^PLUS ハイブリダイゼーションプローブ
• ライトサイクラー ファストスタートDNAマスター^PLUS SYBR Green I

ライトサイクラー ファストスタートDNAマスター^PLUS キット

• ファストスタートDNA Taq DNAポリメラーゼを使用したホットスタートPCRによる高度に特異的なDNA増幅
• 至適化されたマスター成分による高感度で頑健なDNA増幅
• MgCl₂ の変更が必要ない事による優れた簡便性

ライトサイクラー ファストスタートDNAマスターキットは、PCRにおけるその高い特異性と感度で知られていますが、今回、ロシュ・ダイアグノスティックスはライトサイクラー ファストスタートDNAマスター^PLUS キットにより、新しい局面に参入しました。

ホットスタートPCRは、反応の特異性と感度を顕著に改善する事が示されています。ファストスタートDNA Taq DNAポリメラーゼの、アミノ酸残基上の熱不安定性の保護基が、低温で酵素を不活化します。ファストスタート酵素は、95℃での短時間のプレインキュベー ションで活性化されます。

新しいキットのバッファー組成は、より大きな簡便性をもたらします。時間のかかる、入念なMgCl₂ の至適化はもはや必要ありません。ライトサイクラー ファストスタートDNAマスター^PLUS キットの反応ミックスは、MgCl₂ 濃度の調整をする事無く、ほとんどすべてのプライマーの組み合わせでの効率的なDNA増幅を提供します。

新しいキットは、特に高感度のDNA増幅用にデザインされています。それに加え、、新しい成分が、PCRに素晴らしい頑健さをもたらします。PCR阻害に影響を受けにくいため、結果は、サンプル材料の品質による影響が少なくなります。

図1：ライトサイクラー ファストスタートDNAマスターPLUS SYBR Green Iを使用してのウイルスターゲットDNAの増幅。 a) キャピラリー内に1010コピーから1コピーまでの10倍希釈系列。b) 各アンプリコンは単一の特異的なメルティングピークを示す。

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BIOCHEMICA2003NUMBER3(No92)