PCRグレードのdNTPs-PCR実験を完璧にする更なるパワー

Tips & Facts

デオキシリボヌクレオチドは増幅に必須の成分で、それらの化学的純度はPCRやRT - PCRの結果に大きく影響します。

ロシュ・ダイアグノスティックスのPCRグレード デオキシヌクレオチドは、可能な限りの化学的高純度を得るために、特に製造、精製されています。厳密な品質管理法との組み合わせで、優れた機能を保証し、アプリケーションにおいてすべての性能を引き出します。

増強された性能

  • 高分離能HPLCによる可能な限りの精製(>99% dNTP、<0.9% dNTP)。PCRグレードのデオキシヌクレオチドは、増幅反応を成功させるための重大な開始点として提供されます。
  • 特別な製造工程の結果として、このデオキシヌクレオチドは、しばしば増幅反応を阻害する、塩基が修飾されたdNTPやテトラ及びピロリン酸が完全にフリーです(図1)。
図1:ロシュ・ダイアグノスティックスのPCRグレードdNTPs(青)と他社のdNTP(オレンジ)の高分離能HPLCクロマトグラムの比較。

疑わしい結果を回避

  • 各ロットはRNase、DNase、ニッキング活性の不在がチェックされています。これらの夾雑物は、アッセイの結果に大きな影響を与え、擬陰性の結果をもたらします。

至適pHにおける安定性の改善

  • PCRグレードのデオキシヌクレオチドは、pH 8.3の高純度水中にナトリウム塩の形状で供給され、余計な添加剤や安定化剤を含みません。ほとんどの増幅反応は、pH 8から9の間で行われますので、pH 7あるいは7.5で保存されたものに比べ、pHシフトによる化学的ストレスに、より抵抗します。
  • 至適化されたバッファーシステムが、製品の‐20℃での保存安定性を保証します。

増強された感度

  • 各ロットは最も高感度な増幅アッセイが要求される、RT - PCRアッセイで機能試験済みです(図2)。
  • 適切な酵素あるいは酵素ブレンドとの組み合わせで、低コピー数のターゲットの検出を可能にします。
図2:ロシュ・ダイアグノスティックスのPCRグレードdNTPs(a) と他社の色々なdNTP(b)の感度比較。
各ロットは、ヒトジストロフィン遺伝子の1849 - bpフラグメントのRT - PCRアッセイで機能試験済みである。様々な量のヒト骨格筋トータルRNAを1μlのTitan酵素ブレンドとインキュベートした。品質管理テストを通過 するには、PCR産物は、100 pgのトータルRNAから明瞭に見えなければならない。

Order INFO

製品名 製品番号 包装単位 希望価格
PCR Nucleotide Mix
(dATP、dGTP、dCTP、
dTTP 各10 mM)
1581295 200μl
(100回反応)
←製品番号をクリック
1814362 10 x 200μl
(1000回反応)
←製品番号をクリック
PCR Nucleotide MixPlus
(dATP、dGTP、dCTP 各10 mM、
dUTP 30 mM)
1888412 2 x 200μl
(200回反応)
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dNTPセット、PCRグレード 1969064 4 x 25μmol ←製品番号をクリック
dATP、PCRグレード 1934511 25μmol ←製品番号をクリック
1969013 125μmol ←製品番号をクリック
dCTP、PCRグレード 1934520 25μmol ←製品番号をクリック
1969021 125μmol ←製品番号をクリック
dGTP、PCRグレード 1934538 25μmol ←製品番号をクリック
1969030 125μmol ←製品番号をクリック
dTTP、PCRグレード 1934546 25μmol ←製品番号をクリック
1969048 125μmol ←製品番号をクリック
dUTP、PCRグレード 1934554 25μmol ←製品番号をクリック
1969056 125μmol ←製品番号をクリック

BIOCHEMICA2003NUMBER3(No92)

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