ゲノム薬理学研究：ヒトチトクロームP450 2C9 および2C19遺伝子の主要SNPsの ジェノタイピング用ライトサイクラーキット

ライトサイクラー & MagNA Pure コーナー

チトクロームp450（CYP）ファミリーのメンバーは、内在性の物質、栄養原、環境毒物などの代謝に関与しています。チトクローム p450は一般的に使用される薬剤の代謝への関連が知られています。CYPファミリーの各メンバーは好みの基質セットを持っています：CYP2C9はワー ファリン、トルブタミド、フェニトイン、ロサルチンなどの複数の基質を代謝します。CYP2C19で代謝されると記述された基質としては、ジアゼパン、オ メプラゾール、プロプラノロールなどがあります。2つの良く知られる対立遺伝子多型（CYP2C9ではCYP2C9*2 [C430T]とCYP2C9*3 [A1075C]、CYP2C19ではCYP2C19*2 [G681A]とCYP2C19*3 [G636A]）は、1塩基置換により野生型から派生しました。文献は、これら対立遺伝子多型は相当する基質に関する酵素活性の低下に関連することを示唆 しています。

製品の記述

ライトサイクラー－CYP2C9とCYP2C19ミューテーションデテクションキットは、ヒトCYP2C9とCYP2C19遺伝子の2種類の主要な1塩 基置換（SNPs）を同時に検出できます。これは、各キット内のミューテーションデテクションミックスによるデュアルカラー実験とメルティングカーブ分析 により実行されます。各ミューテーションデテクションミックスは、1塩基置換を検出できる配列特異的LC-Red 640標識ハイブリダイゼーションプローブ（すなわち、それぞれC430T[CYP2C9*2]やG636A[CYP2C19*3]）を含みます。ミック スはまた他の1塩基置換を検出できる配列特異的LC-Red 7050標識ハイブリダイゼーションプローブ（例すなわち、それぞれA430C[CYP2C9*3]やG681A[CYP2C19*2]）を含みます。

特徴と利点

簡単な取り扱い

• キットには必要な成分がすべてレディー-ツー-ユースミックスで含まれます。
• 全ての試薬は機能試験済みで、簡便なレディー-ツー-ユース溶液として供給され、更なる至適化の必要無く使用できます。

利点：専門的な知識は必要としません。

迅速で、操作数が少ない

• 増幅とジェノタイピングはライトサイクラー上での組み合せ法で行われます。
• 2つの主要な1塩基置換多型の同時ジェノタイピングが、ライトサイクラーのメルティングカーブ分析を使用して32サンプルを60分以内に可能。

利点：時間の節約／労働コストの削減

信頼性のある性能／標準化されたキットというコンセプト

• プライマーとハイブリダイゼーションプローブは配列特異的です。
• ファストスタートTaq DNAポリメラーゼを最大の特異性と感度を得るために、“ホットスタート”成分として使用しています。
• キットはポジティブコントロールテンプレートとして、ヘテロザイガスなプラスミドDNAを含んでいます。

利点：結果は明瞭で、個々のサンプルやラン間で比較可能です。

以前に保存しておいたカラーコンペンゼーションファイルの使用が、これらのデュアルカラー遺伝子型実験の分析に、まず必要となります。（1本のキャピラ リー中でLC-Red 640とLC-Red 705-標識ハイブリダイゼーションプローブを使用した時チャンネル間で観察される）クロストークを除去するカラーコンペンゼーションファイルの作成は、 ライトサイクラー－カラーコンペンゼーションセットで行えます。これらのキットは、薬剤や毒物の代謝におけるCYP2C9およびCYP2C19遺伝子の関 連性を理解するための研究ツールとして意図されています。

Order INFO

製品名	製品番号	包装単位	希望価格
ライトサイクラー－CYP2C9 ミューテーションデテクションキット	3266982	1キット （最大30サンプル）	←製品番号をクリック
ライトサイクラー－CYP2C19 ミューテーションデテクションキット	3267008	1キット （最大30サンプル）	近日発売
ライトサイクラー －カラーコンペンゼーションキット	2158850	1セット （5キャリブレーション）	←製品番号をクリック

BIOCHEMICA 2002 NUMBER 2（No. 87）