M30 CytoDEATH 抗体、フォルマリングレード

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もっとも初期のアポトーシスイベントの検出

アポトーシスの間に、天然の細胞内タンパク質が切断されます。この過程に介在するプロテアーゼはカスパーゼと呼ばれます。最新の知見でサイトケラチン、特にサイトケラチン No.18がおそらくカスパーゼ3か7により切断され、アポトーシスのもっとも初期のイヴェントにおいて影響を受けることが報告されました[Leers et al, in preparation]。新製品のM30 CytoDEATH抗体はサイトケラチンNo.18内のフォルマリン抵抗性カスパーゼ切断部位を特異的に認識します。この部位は正常細胞の天然サイトケラ チンNo.18では検出されません。TUNEL反応に比べ、この抗体はアポトーシス過程のもっとも初期の明確なイベントを判別します。

図1.CK18のアミノ酸配列。カスパーゼ切断部位とCytoDEATH結合ドメイン。

上皮由来のすべての細胞でのアポトーシスの検出

サイトケラチンは上皮特異的な細胞骨格タンパク質ですので、上皮由来のすべての細胞でのアポトーシスの検出に適しています。HeLa(頚部ガン)、 MCF7(ヒト胸部ガン)、WiDrCCL218(結腸腺腫)、MR65(非小細胞性肺臓ガン)、結腸や胃、肺臓、前立腺、卵巣、胎盤、肝臓、小腸からの 生検での染色に成功しています。

図2.M30 CytoDEATHを用いてのHeLa細胞でのアポトーシスの検出。

蛍光標識抗マウス抗体による二次検出。黒:未処理コントロール細胞。赤:TNFとアクチノマイシン D処理細胞。

　

細胞や組織に最適

このマウスモノクローナル抗体(クローンM30)は接着性細胞や組織サンプルに最適で、繁用される固定パラフィン包埋組織切片に使用することができ ます。また逆行性や凍結切片でも使用することができます。アポトーシスのもっとも初期のイベントを検出することに加え、TUNEL反応ともっとも違う点は 染色パターンで、この抗体の免疫反応性は、アポトーシス細胞の原形質に限られます。M30 CytoDEATHは免疫組織染色、免疫細胞化学、フローサイトメトリーに使用できます。

図3.M30 CytoDEATHを用いてのヒト結腸でのアポトーシスの検出。
ビオチン標識抗マウス抗体とPOD標識ストレプトアビジン、基質AECによる二次検出。ヘマトキシリンによるカウンター染色。

図4.M30 CytoDEATHを用いての、TNFとアクチノマイシン D処理HeLa細胞でのアポトーシスの検出。
蛍光標識抗マウス抗体とヨードプロピディウムによる二次検出。

図5.M30 CytoDEATHを用いてのヒト肺臓でのアポトーシスの検出。
検出は図3と同様。

　

簡単で便利な取り扱い

フォルマリン包埋組織や免疫蛍光の原理はごく一般的な操作法に従いますので、結果は2時間(免疫蛍光)か3.5時間(組織染色、脱ワックスを含まず)で得られます。

　

このユニークな抗体はアポトーシス検出に新たなスタンダードをもたらすでしょう。

製品名	製品番号	包装単位
M30 CytoDEATH	2140322 2140349	50テスト 250テスト
カスパーゼ3 活性 アッセイキット	2012952	96テスト
関連製品名	製品番号	包装単位
Cell Death Detection ELISAPLUS	1774425	96テスト
アポトーシスDNAラダー キット	1835246	20テスト
In Situ Cell Death Detection Kit, Fluorescein	1684795	50テスト
In Situ Cell Death Detection Kit, AP	1684809	50テスト
In Situ Cell Death Detection Kit, POD	1684817	50テスト
TUNEL 酵素	1767305	2x50μl (20テスト)
TUNEL ラベル	1767291	3x550μl (30テスト)
TUNEL AP	1772457	3.5 ml (70テスト)
TUNEL POD	1772465	3.5 ml (70テスト)
TUNEL ダイリューションバッファー	1966006	2x10 ml
アネキシン V-FLUOS染色キット	1858777	50テスト
アネキシン V-FLUOS	1828681	250テスト
アネキシン V-ビオチン	1828690	250テスト
アネキシン V-AlexaTM 568	1985485	250テスト
Anti-PARP	1835238	100μl
Anti-Fas(CD95/APO-1)	1922432	100μg (1000テスト)
Anti-Fas ビオチン(CD95/APO-1)	1922459	100μg (100テスト)