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新製品の酵素免疫測定法チロシナーゼRT-PCR ELISAは高感度、高特異的にRT-PCR増幅によりチロシナーゼのmRNAを定量検出するために特にデザインされています。RT-PCR ELISAはPCRの特性と、スタンダードなELISA法を組み合わせたもので、他の検出法より多くの利点を持ちます。
測定はRT-PCRによるチロシナーゼ特異的mRNA配列の増幅と、ELISAによる増幅物の検出に基づいています。
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血液5 mlに加えたMelJu細胞数 |
血液サンプル数(別人より) |
チロシナーゼ陽性サンプル(数) |
チロシナーゼ陽性サンプル(%) |
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0 |
22 |
0 |
0 |
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1 |
22 |
10 |
46 |
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5 |
22 |
22 |
100 |
表1: ヒト血液中のチロシナーゼmRNAの検出。
チロシナーゼRT-PCR ELISAの利点
サンプル試料としては、ヒト血液や骨髄、組織(リンパ節など)よりの精製mRNA(100 ng mRNA)やトータルRNAが使用できます。少なくとも46サンプルが処理でき、7時間で分析できます。
チロシナーゼはメラノサイトやメラノーマ細胞、末梢グリア細胞を含むニューロエクトダーム由来細胞に特異的に発現しています。チロシナーゼはメ ラノサイトにのみ特異的に発現されるので、細胞株特異マーカーの候補とみなすことができ、通常チロシナーゼ活性ネガティブのサンプル試料(血液、骨髄、リ ンパ節)を用いることにより、メラノーマ細胞を検出することができます。
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操作法 |
時間 |
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1.RT-PCR |
約3時間 |
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2.ネステッドPCR |
約1.5時間 |
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3.ハイブリダイゼーションと分光光度計による検出 |
約2.5時間 |
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実際の操作時間 |
約1時間 |
表2.アッセイ時間
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製品名 |
製品番号 |
包装単位 |
|---|---|---|
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チロシナーゼ RT-PCR ELISA |
96回反応 |
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関連製品名 |
製品番号 |
包装単位 |
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MIA ELISA |
96回反応 |
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テロメラーゼ PCR ELISA |
96回反応 |
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P53 pan ELISA |
96回反応 |
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mRNA アイソレーションキット(組織用) |
1 kit |
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mRNA アイソレーションキット(白血球用) |
1.5 ml(5 ml)サンプルを100(30)回精製 |
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mRNA アイソレーションキット(血液/骨髄用) |
1.5 ml(5 ml)サンプルを100(30)回精製 |
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血液/骨髄スタビライゼーション試薬 |
サンプル50 ml分 |
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エアロゾル耐性ピペットチップ |
960チップ |
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Thin-walled PCR チューブ |
1000チューブ(200μl) |
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