ウイルス核酸の迅速、多検体精製に! High Pure 16 システム

1 New Products

High Pure 16 システムウイルス核酸キットは、High Pure 16 システムの初めての製品で、血清、血漿、培養上澄よりの、増幅に直接使用できるウイルス核酸の精製のためにデザインされています。分離操作はシリカへの吸着に基づき、次のステップより成ります。

1. サンプルをまず特殊なバッファーと高温で溶解し、核酸を放出させます。
2. 核酸はグラスファーバー塊に結合し、洗浄操作により不純物を取り除きます。
3. 清々核酸をヌクレアーゼフリーの水中に溶出します。

本システムは多数サンプルを短時間で処理することを可能にし、煩雑な操作を必要としたり、有毒物質を使ったりすることはありません。特別にデザイン されたシステムラックにより16サンプルを同時に処理できるため、ハンドリングに要する時間が30%短縮されます。32サンプルでは10分間の操作時間 で、トータル30分以内に処理できます。またこのシステムにより、クロスコンタミネーションやサンプルの間違いなどの危険性が最小限になります。

図1:システムラックはマイクロタイタープレートのフォーマットに従い、ナンバリングされたウェルを持つ。グリッパーをラックの縁に取り付けること により、8穴同時に開閉することができる。システムは溶解ラック(透明1)、フィルターチューブラック(黄色II),廃棄コンテナー(白)、溶出ラック (青IIIa)、カバーラック(青IIIb)及び4個のグリッパーより構成されている。

High Pure 16 システムウイルス核酸キットは200μlのサンプルを96回精製することが出来、下記の付随製品を別途購入することで、容易にスケールアップが可能です。 調製されたウイルス核酸(RNA;DNA)は直接、標準およびロングPCRやRT-PCRに使用でき、高収量と高感度で特異的なPCR産物を作成できま す。

　

High Pure 16 システムウイルス核酸キットで血漿からM-MuLVウイルスRNAを精製し、増幅した結果を図3に示します。

High Pure 16 システムの利点

• クロスコンタミネーションの危険を最小限にする
• 多数サンプルを平行して処理できる
• 各分離操作で16個のサンプルを取り違えることが無い
• マイクロタイタープレート遠心器にフィットする
• より多数サンプルの扱いが容易
• テンプレートは高収量で高純度である
• 関連製品で色々な要求に適用できる
• 希少な分析物の増幅と検出が可能
• 至適なサンプルのプール

図2.組換えM-MuLVウイルスの血漿への希釈系列を、キットのスタンダードな操作法により精製した。血清注のM-MuLVウイルスRNAの検出は、ワンステップRT-PCR(Titan ワンチューブRT-PCRシステム)で行った。228 bpのDNA断片がアガロースゲル上で可視化された。

レーン1:ベーリンガー・マンハイムDNA MWM VI;

レーン2:陽性コントロール: 5 ng M-MuLV RNA;

レーン3+4: 2.5 x 10⁶ pfu/mlのサンプル、25000コピー/PCRに相当

レーン5+6: 5 x 10⁵ pfu/mlのサンプル、5000コピー/PCRに相当

レーン7+8: 2.5 x 10⁵ pfu/mlのサンプル、2500コピー/PCRに相当

レーン9+10: 5 x 10⁴ pfu/mlのサンプル、500コピー/PCRに相当

レーン11+12: 2 x 10⁴ pfu/mlのサンプル、250コピー/PCRに相当

レーン13+14: 5.2 x 10³ pfu/mlのサンプル、50コピー/PCRに相当

レーン15+16: ウイルス粒子無し

レーン17:陰性コントロール: 水でのRT-PCR

　

またこのシステムの付随製品も個別に購入することができます。

　

－High Pure 16 システム ヒーティングブロック(Cat.No.2011867)

血清、血漿、培養上澄よりの高温での核酸の放出時に必要です。

　

－High Pure 16 システム ライシスラック

サンプル容量が多い場合、1ウェル当たり1500μlの容量を持つラックも別途入手可能です。

－High Pure 16 システム ウェイストコンテナー

ウェイストコンテナーは遠心ステップで流れ出す溶液を捕捉するためのフリースパッドを備えています。このフリースの保持量は1800μlです。

製品名	製品番号	包装単位
High Pure 16 システム ウイルス核酸キット	2011816	6 x 16回分離
High Pure 16 システム ウイルス核酸 バッファーセット	2011875	100回分離
High Pure 16 システム ライシスラック	2014530	12ラック
High Pure 16 システム ウェイストコンテナー	2014548	12コンテナー
High Pure 16 システム ヒーティングブロック	2011867	1個