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NEW！サイトカインRT-PCRキット－希少なメッセージの高感度検出に
1 New Products
サイトカインは免疫応答の間に産生されるタンパク質ホルモンで、その機能は一般および特殊免疫の仲介と調節です。炎症や感染症、新生物疾患などの病 原論や移植細胞や器官の拒否において重要な役割を持っています。従来mRNAの検出にはノーザンブロットが用いられてきましたが、この方法は希少なメッ セージを検出出来るほどの感度が無く、またサンプル中の真の量ではなく他のサンプルと相関するメッセージ量に関する情報しかもたらしませんでした。
ロシュ・モレキュラーバイオケミカルズの新しいサイトカインRT-PCRキットを用いてのRT-PCRによるmRNAの定量は、特異的発現レベルの研究において最も高感度な方法でノーザンブロットより優れており、サンプル中1000コピー以下の感度を示します。
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測定域：103 － 107コピーmRNA 感度：< 1000コピー/サンプル 特異性：プライマーは以下の特異的増幅のためにデザインされている。
測定内変動： < 10% 測定間変動： < 25% 表4：サイトカインRT-PCRの特徴データ。 |
本キットは正確な定量法を保証します。既知濃度のスタンダードmRNAによりサンプル中の正確なmRNAのコピー数の測定が可能になります。またコントロール細胞をRNAスタンダード中に加える事により、RNA分離や逆転写間の変動を補正する事が出来ます(図7)。
図7. サイトカインRT-PCRキットの測定原理。
キット内容
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1. コンペティターmRNA |
107コピー/μl；60μl |
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2. 希釈バッファー |
1ml |
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3. サイトカインプライマー(ビオチン標識) |
20μM；171μl |
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4. サイトカイン検出プローブ(DIG標識) |
25 ng/μl；80μl |
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5. コンペティター検出プローブ(DIG標識) |
25 ng/μl；80μl |
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6. ヌクレオチドミックス |
10 mM；120μl |
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7. RT-PCR酵素ミックス(リバーストランスクリプターゼとExpand High Fidelityの酵素ミックス) |
120μl |
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8. RT-PCR反応バッファー(5x) |
1 ml |
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9. DTT溶液 |
0.1 M；1 ml |
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10. コントロール細胞 |
1000細胞/μl；130μl |
またPCR ELISA検出フォーマットによりサンプル中のmRNAコピー数の計算が容易になります。多検体処理も簡単で、数値もマイクロタイタープレートリーダーで 記録出来ます。培養細胞や末梢血リンパ球(PBL)がサンプルとして使用可能で、総アッセイ時間は9.5時間です。
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製品名 |
製品番号 |
包装単位 |
|---|---|---|
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h-Interleukin-1βRT-PCR Kit |
約20テスト(6ポイント測定) |
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h-Interleukin-2 RT-PCR Kit |
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h-Interleukin-4 RT-PCR Kit |
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h-Interleukin-10 RT-PCR Kit |
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h-Interferon-γ RT-PCR Kit |
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h-Tumor Necrosis Factor-αRT-PCR Kit |
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h-Interleukin-6 RT-PCR Kit |
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関連製品 |
製品番号 |
包装単位 |
|
High Pure RNA Isolation Kit |
50回精製 |
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PCR ELISA(DIG Detection) |
5パック( |
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